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上海莼試生物技術有限公司
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ATCC細胞復蘇的原則-快速融化

時間:2018-4-18閱讀:137
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ATCC細胞必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
具體操作
1.實驗前準備
 (1)將水浴鍋預熱至37℃。(使用燒杯盛裝37度水也可)
 (2)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面.
(3)在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
 2.取出凍存管
 (1)根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
 (2)從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
 3.迅速解凍
 (1)迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
 (2)約1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
 4.平衡離心
(將凍存管中的液體倒入離心管中,加入4ml培養基,離心——除去DMSO)用托盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min離心3min。
 5.制備細胞懸液
 (1)吸棄上清液。
 (2)向離心管內加入10ml培養液,吹打制成細胞懸液。
 6.ATCC細胞計數:細胞濃度以5×105/ml為宜。
Triamterene     200mg    三氨喋啶標準品    396-01-0 
Tributyl Citrate     500mg    檸檬酸三丁酯標準品    77-94-1 
Tributyl Phosphine Oxide    25mg    三正丁基氧化磷標準品    814-29-9 
Trichlormethiazide    200mg    三氯噻嗪標準品    133-67-5 
Triclosan     200mg    三氯生標準品    3380-34-5 
Tridihexethyl Chloride    200mg    曲地氯銨標準品    4310-35-4 
Trientine Hydrochloride    200mg    鹽酸三乙烯四胺標準品    38260-01-4 
Triethyl Citrate     500mg    檸檬酸三乙酯標準品    77-93-0 
Trifluoperazine Hydrochloride     200mg    鹽酸三氟拉嗪標準品    440-17-5 
Triflupromazine Hydrochloride    200mg    鹽酸三氟丙嗪標準品    1098-60-8 
ATCC細胞

 

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