熒光涉及光的吸收和發(fā)射兩個過程，因此任何熒光化合物，都有兩種特征的光譜:激發(fā)光譜(excitation spectrum)和發(fā)射光譜(emission spectrum)。

　　1、激發(fā)光譜

　　熒光屬于光致發(fā)光，需選擇合適的激發(fā)光波長(Ex)以利于檢測。激發(fā)波長可通過熒光化合物的激發(fā)光譜來確定。激發(fā)光譜的具體檢測辦法是通過掃描激發(fā)單色器，使不同波長的入射光激發(fā)熒光化合物，產(chǎn)生的熒光通過固定波長的發(fā)射單色器，由光檢測元件檢測。終得到熒光強度對激發(fā)波長的關系曲線就是激發(fā)光譜。在激發(fā)光譜曲線的大波長處，處于激發(fā)態(tài)的分子數(shù)目多，即所吸收的光能量也多，能產(chǎn)生的熒光。當考慮靈敏度時，測定應選擇大激發(fā)波長。

　　2、發(fā)射光譜

　　一般所說的熒光光譜，實際上僅指熒光發(fā)射光譜。它是在激發(fā)單色器波長固定時，發(fā)射單色器進行波長掃描所得的熒光強度隨熒光波長(即發(fā)射波長，Em)變化的曲線。熒光光譜可供鑒別熒光物質(zhì)，并作為熒光測定時選擇合適的測定波長的依據(jù)。

　　另外，由于熒光測量儀器的特性，使光源的能量分布、單色器的透射率和檢測器的響應等性能會隨波長而變，所以同一化合物在不同的儀器上會得到不同的光譜圖，且彼此間無類比性，這種光譜稱為表觀光譜。要使同一化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的熒光光譜，則需要對儀器的上述特性進行校正。經(jīng)過校正的光譜稱為真正的熒光光譜。

　　激發(fā)波長和發(fā)射波長是熒光檢測的必要參數(shù)。選擇合適的激發(fā)波長和發(fā)射波長，對檢測的靈敏度和選擇性都很重要，尤其是可以較大程度地提高檢測靈敏度。