LH-PCR非洲豬瘟實驗室檢測設備清單-????? ????? ?????? ????? ??? ???????? ?????????LH-PCR非洲豬瘟實驗室檢測設備清單用于運行病毒檢測實驗，并對實驗數據進行分析;儀器既可在實驗室內操作，又可用于野外科學實驗，配合相應試劑，對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標核酸進行快速、準確的定性檢測。

　　儀器配套非洲豬瘟病毒核酸快速檢測試劑盒(熒光 RPA 法)、非洲豬瘟病毒核酸檢測試劑盒(實時熒光 PCR 法)，可以滿足非洲豬瘟核酸現場快速檢測需求。可定量快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍耳、偽狂犬等疾病，廣泛應用于養殖場、屠宰場、食品加工廠、肉產品深加工企業、*、*、檢驗檢疫單位使用。

　　實驗員需要經過實驗室技術和儀器、軟件操作的專門培訓，具備熟練的相關操作技能。

　　儀器特點

　　1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿足外出實驗的需求。

　　2.內置7寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡便快捷。

　　3.Marlow高品質Peltier制冷片，結合德國PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補償邊緣的溫度控制模式，大升溫速度6℃，大降溫速度5℃，大大縮短實驗時間。

　　4.整板3s快速采光模式，保證實驗結果孔位一致性。

　　5.簡潔直觀的軟件引導，輕松開啟檢測實驗。

　　獸用

　　【獸藥名稱】

　　通用名稱：非洲豬瘟病毒熒光PCR快速檢測試劑盒

　　商品名稱：無

　　漢語拼音：Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Kuaisu Jiance Shijihe

　　英文名稱：Real-time PCR for Rapid Detection of African Swine Fever Virus

　　【主要成分與含量】

　　序號含量1PCR反應液1管(1ml/管)2管(5ml/管)Solution B 1.5

　　4陰性對照 1管(0.5ml/管)

　　1管(0.25ml/管)

　　【作用與用途】本試劑盒適用于豬血液、豬肉組織、淋巴結、脾臟等樣本中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。

　　【用法與判定】

　　1 用法

　　1.1 樣品處理及模板準備

　　1.1.1 樣品處理

　　·血液樣品無需處理，取200μl備用。

　　1.1.2 模板準備

　　·將樣本加入到1.5 ml離心管中，加入下表推薦體積的Solution A，渦旋震蕩20 s，并按照下表推薦的處理方法，室溫靜置3-5 min，或95℃金屬浴振蕩孵育3-5 min。

　　·處理后的樣本如在2小時內進行下一步試驗，請于4℃保存，如不能立即進行下一步試驗，請于-20℃保存。

　　樣本類型樣本用量Solution A處理溫度及時間Solution B全血10 μl100 μl室溫靜置3-5min100 μl

　　1

　　組織勻漿10 μl100 μl室溫靜置3-5min100 μl備注：組織樣本加入10倍體積的生理鹽水制成組織勻漿液后，可按照血液樣本的處理方法進行處理。

　　1.1.3可利用商品化試劑盒提取核酸進行反應，效果更佳

　　1.2 熒光PCR擴增

　　1.2.1 試劑準備

　　按下表1體系，在配套PCR管中配制反應體系，蓋緊管蓋后瞬時離心10秒，轉移至擴增區。

　　體積PCR反應液18μl預準備的模板(樣本/對照)2μl

　　1.2.3 PCR擴增

　　表2 儀器PCR擴增參數

　　2 判定

　　2.1 合理調整閾值線，不同儀器可根據儀器噪音情況進行調整。

　　2.2 試劑盒有效性判定

　　·陽性對照：Ct值≤30，有明顯指數增長，呈典型的S型曲線。

　　2.3 樣本結果判定

　　·樣本檢測結果38

　　·樣本檢測結果無Ct值，判定為陰性，表明樣本中未檢測出非洲豬瘟病毒。

　　【注意事項】

　　(1)實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書，嚴格按步驟執行，不使用本試劑盒提供的組份或不按照說明書進行實驗可能導致錯誤結果。

　　(2)所有試劑應在規定溫度儲存。-20℃保存的試劑在使用前應充分混勻。試劑盒反復凍融次數不宜超過5次。

　　(3)實驗操作應按照國家有關臨床基因擴增實驗室管理規范執行，實驗過程應分區(試劑準備區、樣本制備區、核酸擴增區)，各區物品為，不得交叉使用，避免污染。

　　(4)操作臺、移液器、離心機等儀器用品應經常用1%次氯酸鈉、75%乙醇或紫外燈進行消毒。耗材應進行無酶處理。

　　(5)待檢樣本、試劑盒組份及實驗中的廢棄物需按照具有潛在傳染性物質處理方法進行處理。

　　(6)為防止熒光干擾，應避免使用含熒光物質的手套，避免用手直接接觸，預防交叉污染。

　　(7)檢測結果為陰性，并不*代表為非感染狀態，具體診斷需結合獸醫臨床。

　　(8)產生假陰性的可能原因為：待檢樣本在采集、運輸、保存及核酸提取過程中操作不當造成DNA降解;樣本中核酸濃度低于低檢測限;病毒待測靶基因出現變異;未經驗證的其他干擾因素。

　　(9)產生假陽性的可能原因為：待檢樣本采集、運輸及核酸提取過程中發生交叉污染。