間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體（抗*抗體）以檢測與固相抗原結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下： 

一、將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。 

二、加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復

合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。 

三、加酶標抗抗體。可用酶標抗人 Ig  以檢測總抗體，但一般多用酶標抗人 IgG  檢測 IgG  抗

體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗體抗體結合，從而間接地標記上酶。洗滌后，固相載

體上的酶量與標本中受檢抗體的量正相關。 

四、加底物顯色

本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。間接法的優點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。

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