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日前,我公司實(shí)驗(yàn)室技術(shù)部人員來到公司總部,當(dāng)日下午會(huì)議討論ELISA試劑盒檢測(cè)方法的利弊,王總、何副總,各部門代表人員及全部技術(shù)人員參與。會(huì)中,技術(shù)人員們主要介紹了ELISA的直接法和間接法。會(huì)后,技術(shù)代表歐陽將內(nèi)容整理出發(fā)給了編輯部分享給各位朋友們。
一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
1.優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
2.缺陷:實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。
二、間接法
此測(cè)定辦法與直接法相似,不一樣在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量。
1.優(yōu)勢(shì):二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種挑選能做不一樣的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
2.缺陷:交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。
被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量;或不符號(hào),再透過酶符號(hào)的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。這兩種抗體有必要當(dāng)心選擇,才可防止交互反響或競(jìng)爭(zhēng)一樣的抗原部位。
1.優(yōu)勢(shì):高活路,高專一性,抗原無須事前純化。
2.缺陷:抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體部位。
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