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技術在線解答ELISA實驗洗板操作相關問題

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2015年10月10日 10:38  

近日,貴州大學韓同學經同學介紹與我司取得。并訂購了人MDA、TAOC ELISA試劑盒。在實驗洗板操作過程中遇到一些棘手問題,于是致電我司咨詢,希望我司技術解決其相關問題。主要問題如下:

問題1:說明書上說洗板時要把孔里的水甩干,可我做的時候,無論我怎么拍,孔底還是有殘留液體,請問這對試驗有沒有影響?或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個問題?

答:有一定的影響.尤其二抗反應后洗滌不好,會出現非特異.ELISA試驗中洗滌是關鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是zui后一次洗滌要盡量干.洗滌中另一個值得注意的是盡量不要出氣泡. 如果有條件的話,可用洗板機。

問題2:1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多.

答:1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作,背景高不一定是封閉的問題。

問題3:什么才叫封閉好了呢?有沒有什么標準?

答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果還有非特異反應的話,可能有其他原因,比如加樣時濺到了壁上或有氣泡,洗滌不充分,二抗濃度過高,封閉物不合適以及反應條件是否得當等。

在我司技術的指導下,韓同學成功完成了之后的實驗,并且實驗取得預期理想結果。韓同學對我司技術服務贊不絕口,上海滬鼎感謝韓同學對我司的認可,我司會一直秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業添磚加瓦。

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