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培養基的配置方法

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2015年09月30日 10:39  

培養基的配制方法: 

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量,一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊

加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調PH

用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養基調節到所要求的值。

4.過濾

濾紙或棉花進行過濾。

5.分裝

一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養,則100 ml培養基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過150 ml培養基/250 ml的

三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15~20 ml培養基/250

ml的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

固體斜面培養基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養

基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。

9.貯存

培養基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于4℃冰箱中備用。

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