小鼠顆粒體蛋白（GRN）elisa定量檢測試劑盒

檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗顆粒體蛋白(GRN)抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的顆粒體蛋白(GRN)會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入*化的抗顆粒體蛋白(GRN)抗體和 辣根過氧化物酶標記的親和素。抗顆粒體蛋白(GRN)抗體與結(jié)合在包被抗體上的顆粒體蛋白(GRN)結(jié)合、*與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根 過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，顆粒體蛋白(GRN)濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中顆粒體蛋白(GRN)的濃度。

小鼠顆粒體蛋白（GRN）elisa定量檢測試劑盒

樣品收集:

1.血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集 血液的試管應為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。

2.血漿：抗凝劑*使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可 檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。

3.組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會 影響測量結(jié)果），稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體 積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。 *在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組 織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘， 取上清檢測。

4.細胞培養(yǎng)上清：取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。

5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測 具體處理方法可參考：

6.樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。

7.樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍 存于-20℃(1個月內(nèi)檢測)，或-80℃（6個月內(nèi)檢測），避免反復凍融。

8.如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當倍數(shù)稀釋（建議先 做預實驗，以確定稀釋倍數(shù)）。