細(xì)胞凋亡檢測染色體DNA 以核小體為單位的切割導(dǎo)致細(xì)胞不可逆死亡?？梢圆捎肗ucleosome ELISA，對產(chǎn)生的單體及寡聚核DNA *段進(jìn)行定量。核小體的DNA 成分被捕獲于酶標(biāo)板上，使用*標(biāo)記的抗組蛋白抗體檢測捕獲的核小體數(shù)量。組蛋白-DNA *段的量反應(yīng)了一個(gè)特定樣品中死亡及瀕臨死亡的細(xì)胞的量。

    DNA *段也可通過片段末端標(biāo)記進(jìn)行原位檢測，DNA *段末端標(biāo)記可通過熒光染料或比色底物方法進(jìn)行檢測。另外，細(xì)胞形態(tài)的變化如胞膜皺摺或出泡、核染色質(zhì)致密、胞質(zhì)濃縮等，都可作為細(xì)胞凋亡的證據(jù)。采用熒光染料進(jìn)行末端標(biāo)記的可用流式細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行定量，其光散射變化也可支持由單一參數(shù)得出的結(jié)論。DNA *段可以從凋亡細(xì)胞中分離（Suicide TrackTM DNA ladder Isolation Kit, ）并使用瓊脂糖電泳進(jìn)行分析。約180bp 的多倍寡核小體片段在電泳上呈典型的梯狀條帶，可進(jìn)一步證實(shí)凋亡的存在。若使用Pellet Paint Co-Precipitant，只需室溫操作，兩分鐘即幫助DNA 沉淀更快捷方便。

    線粒體膜電位和膜通透性的變化也是凋亡細(xì)胞一個(gè)重要特點(diǎn)?？墒褂肅ytochrome c ELISA Kit或Cytochrome c Release Apoptosis Assay Kit試劑盒檢測凋亡細(xì)胞線粒體所釋放的*。也可使用Cytosol/Mitochondria Fractionation Kit分離凋亡細(xì)胞線粒體，其膜電位可通過MitoCaptureTM Apoptosis Detection Kit檢測。細(xì)胞凋亡檢測另一個(gè)生化特征是細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰*從胞質(zhì)轉(zhuǎn)至胞外。膜聯(lián)蛋白中的Annexin Ⅴ，是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰*有強(qiáng)親和力。通過使用Annexin Ⅴ-FITC或 Annexin Ⅴ-Biotin ,Apoptosis Detection Kit ，及RAPIDTM 方法進(jìn)行凋亡細(xì)胞早期檢測。可使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡監(jiān)測。同時(shí)使用PI，根據(jù)細(xì)胞膜的通透性區(qū)分早期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。

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細(xì)胞凋亡檢測