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細胞培養實驗中三個主要瓶頸

時間:2017-12-20閱讀:144
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核型正常的細胞培養在植板(plating)之后只有少數能夠分裂,而且它們的子細胞還會出現持續性的死亡,很少能形成可以*增殖的克隆。

Sheffield大學的Peter Andrews教授和Daniel Coca教授*研究團隊,對單個人類胚胎干細胞進行了延時成像,并由此鑒定了限制干細胞生長的主要瓶頸。研究顯示,在*培養過程中發生了適應性突變的干細胞,受到的生長限制有所緩解,能夠進行更有效的擴增。

Sheffield大學的Dr Ivana Barbaric說:“我們研究胚胎干細胞,是因為它們有成為任何細胞類型的潛力。通過體外培養獲得大量未分化的胚胎干細胞,是用這些細胞進行治療的前提。問題是這些細胞在體外培養時容易大量死亡,擴增效率比較低。”

“在*體外培養的條件下,胚胎干細胞能夠通過自發突變,提高自己的生長能力。為了安全使用這些細胞進行治療,我們需要了解培養條件對細胞的影響,以及細胞對此做出的適應。”

研究人員將延時顯微成像、單細胞追蹤技術和數學模型結合起來,對普通胚胎干細胞和已經適應培養的干細胞進行了比較。他們從中確定了影響克隆形成的三個主要瓶頸:植板后的細胞生存情況、細胞進入有絲分裂的情況、以及分裂后的細胞死亡情況。

研究顯示,在同樣的培養條件下,已經適應細胞培養在上述三個方面表現更好,能夠形成更多的克隆。此外,增加細胞間的接觸或者添加促進細胞生存的化合物,也能緩解這三方面的問題。
    20mg/支    HPLC≥98%    白楊素-6-C-葡萄糖基-8-C-阿拉伯糖甙
Camptothecine    20mg/支    HPLC≥98%    *
Euhorbiasteroid    20mg/支    HPLC≥98%    續隨二萜醇
Lathyrol    20mg/支    HPLC≥98%    千金子二萜醇
Borneol    20mg/支    HPLC≥98%    龍腦
5-hydroxymethyl-2-furaldehyde    20mg/支    HPLC≥95%    5-羥甲基糠醛
β-Carotene    20mg/支    HPLC≥90%    β-胡蘿卜素
Patchouli alcohol    20mg/支    HPLC≥98%    百秋李醇
Dehydrocostus Lactone    20mg/支    HPLC≥98%    去氫木香內酯
Costunlide    20mg/支    HPLC≥98%    木香烴內酯
細胞培養

 

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