慢病毒感染細(xì)胞，為什么你的效率那么低

   那綠色讓人看了神清氣爽。一陣涼爽的風(fēng)輕輕拂來(lái)，葉子“沙拉沙拉”地奏起了*的樂(lè)曲，伴著小鳥(niǎo)興奮而快樂(lè)的“嘰啾”聲，形成了一首美妙的自然交響樂(lè)。現(xiàn)在為你介紹   慢病毒不但可感染分裂或非分裂細(xì)胞，還可將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而實(shí)現(xiàn)持久表達(dá)，又很少引發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)。被譽(yù)為「細(xì)胞實(shí)驗(yàn)首.xuan、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)*」工具病毒。

并且作為基因載體在治療各類(lèi)遺傳性和后天性的人類(lèi)疾病中倍受歡迎：從基礎(chǔ)研究發(fā)展到臨床階段，高濃度、高感染效率的慢病毒都是感染細(xì)胞表達(dá)（或沉默）目的基因的理想分子工具。

那么慢病毒在感染細(xì)胞中有什么優(yōu)良表現(xiàn)呢？

慢病毒感染細(xì)胞的步驟一般是這個(gè)樣子的，以「24 孔培養(yǎng)板、貼壁細(xì)胞」為例：

Day0: 接種細(xì)胞

每孔按 5×104 個(gè)待感染細(xì)胞鋪板，用含有 10% FBS 的 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng);

Day1: 細(xì)胞感染

感染前，根據(jù)說(shuō)明書(shū)用*培養(yǎng)基配置感染液，備用吸掉舊培養(yǎng)基，更換為感染液; 并參考細(xì)胞 MOI 值，計(jì)算病毒使用量，加入病毒進(jìn)行感染，混勻;

Day2 

病毒感染 8~16 h 后，換回常規(guī)培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng);

Day3~4: 確認(rèn)感染效果

感染 72 h 后，顯微鏡下觀察感染效果，如 EGFP、Cherry 的表達(dá)情況；

如果都這么簡(jiǎn)單的話，那你真的是 too young too simple！ 

那么在慢病毒感染細(xì)胞過(guò)程中，到底會(huì)遇到哪些問(wèn)題呢？此貼統(tǒng)統(tǒng)幫您搞定~~