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其它elisa免疫檢測試劑盒實驗條件選擇的重要性

時間:2018/4/10閱讀:148
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其它elisa免疫檢測試劑盒中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的Z適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值Z大而蛋白量Z少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml.
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。其它elisa免疫檢測試劑盒有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。
檢查    100mg    171254-200401    2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮
檢查    100mg    171254-200401    *雜質B
鑒別    100mg    171256-200401    鹽酸*
有關物質    50mg/支    171267-201001    2-氨基-5-硝基二苯酮
有關物質    50mg/支    171267-201001    *雜質
有關物質    50mg/支    171268-201001    2-氨基-5-氯二苯酮
有關物質    50mg/支    171268-201001    氯氮卓雜質Ⅰ
有關物質    20mg    171270-201001    N-脫烷基西泮
有關物質    20mg    171270-201001    *雜質
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