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135次細胞免疫熒光簡單實驗步驟如下:
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小時.
2.-20度甲醇固定20分鐘后,自然、干燥 10分鐘
3.PBS洗凈:3min*3
4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS
5.PBS洗凈:2*5min
6.羊血清封閉：37度，20分鐘
7.一抗，4度過夜，一般要大于18小時或者37度 1-2小時
8.4度 PBS洗凈，3min*5次
9.二抗 37度小于一小時
10.37度 PBS洗凈，3*5min
涼干封片(封閉液PH8.5)
不管采用何種方法，在使用PBS緩沖液漂洗時，都要漂洗干凈并且要測下pH值，可以使用PBS多清洗幾次，也可以延長PBS清洗時間，如果結果背景較高可以延長漂洗的次數和時間。
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