人源細胞提供的對實驗結(jié)果判定說明是接種細菌于37℃培養(yǎng)24h，滴加V-P甲、乙液后在30min內(nèi)觀察結(jié)果，變紅色為實驗陽性，不變色為陰性。然而在實際工作中，此方法會造成一些實驗結(jié)果的誤判，并不是所有的細菌都適用上述判定方法。
V-P實驗常用于細菌檢測，可檢驗細菌利用葡萄糖產(chǎn)生中性乙酰甲基甲醇的能力，在堿性環(huán)境下，乙酰甲基甲醇被空氣中氧氣氧化成二乙酰，二乙酰與培養(yǎng)基內(nèi)蛋白胨中*所含有的胍基反應(yīng)可生成紅色化合物。
蠟樣菌V-P培養(yǎng)基培養(yǎng)24h，滴加甲、乙液后30min內(nèi)呈現(xiàn)陽性，證明試驗用V-P培養(yǎng)基無質(zhì)量問題。單增菌V-P培養(yǎng)基分別于30℃和37℃培養(yǎng)24h、48h、72h、96h，實驗結(jié)果如下表。通過實驗我們發(fā)現(xiàn)兩種現(xiàn)象。其一，單增菌培養(yǎng)的時間短，出現(xiàn)陽性結(jié)果慢，隨著培養(yǎng)時間延長，陽性結(jié)果出現(xiàn)的時間縮短。其二，48h內(nèi)，單增菌于30℃培養(yǎng)要比在37℃培養(yǎng)陽性結(jié)果出現(xiàn)的快些。
究其實驗原理，V-P實驗顯色不同于糖醇類培養(yǎng)基顏色變化，因其中所含指示劑變化特別靈敏。該實驗zui終出現(xiàn)紅色物質(zhì)與二乙酰的含量有直接關(guān)系，二乙酰含量大，它與胍基生成的紅色物質(zhì)就多，觀察到培養(yǎng)基顯紅色的速度就快，二乙酰含量少則反之。試驗中，隨著培養(yǎng)時間的延長，單增菌利用葡萄糖生成的乙酰甲基甲醇含量越來越多，乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰的含量也就越來越多，從而陽性結(jié)果顯現(xiàn)的時間隨之縮短。相對于37℃，單增菌于30℃培養(yǎng)更適宜生長，并且在相同的培養(yǎng)時間內(nèi)，其利用葡萄糖生成的乙酰甲基甲醇含量更多些，尤其48h內(nèi)表現(xiàn)得更為突出。
從人源細胞大量的實際工作中發(fā)現(xiàn)，有些細菌的生化實驗不應(yīng)*按照試劑盒說明書的方法去做，應(yīng)參考其生物學(xué)特點，在必要時做出適當?shù)恼{(diào)整，才能得到更加可信、滿意的實驗結(jié)果。正如上述實驗，若按試劑盒提供的結(jié)果判定說明，培養(yǎng)72h內(nèi)的陽性結(jié)果均超過30min，理應(yīng)判定為陰性，而單增菌更適宜于30℃生長，且生長緩慢，從而V-P實驗需要適當?shù)难娱L培養(yǎng)時間，4h內(nèi)觀察結(jié)果為宜，所以不能輕易地判定為陰性。
40957-83-3     Glycitein    黃豆黃素標準品    15mg
40246-10-4     Glycitin    黃豆黃甙標準品    15mg
33996-58-6     Levetiracetam Racemic Mixture     *外消旋混合物標準品    15mg
    N-Demethylazithromycin    n-去甲基*標準品    15mg
    Neotame Related Compound A    紐甜相關(guān)物質(zhì)A標準品    15mg
    Open Ring Aztreonam    開環(huán)*標準品    15mg
6233-83-6     Oxytocin Identification    羥可待酮鑒別標準品    15mg
    Piroctone Related Compound A    吡羅克酮相關(guān)物質(zhì)A標準品    15mg
206184-49-8     Tenofovir     泰諾福韋標準品    15mg
    Tiagabine Related Compound A    噻加賓相關(guān)物質(zhì)A標準品    15mg
3569/10/6    Valerenic Acid    纈草烯酸標準品    15mg
32911-62-9     Withanolide A    睡茄交酯 A標準品    15mg
人源細胞