4× 核酸液相雜交液10mL品牌的詳細(xì)介紹: 我們提供 基因組RNA/DNA提取、實(shí)驗(yàn)報告 質(zhì)量保證 高純度RNA/DNA、完整性 貨期 3-5個工作日 4× 核酸液相雜交液10mL品牌服務(wù)流程 1)客戶提供材料 2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質(zhì) 4× 核酸液相雜交液10mL品牌客戶提供 ●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細(xì)胞、細(xì)菌等) ●4℃保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝) ●詳細(xì)的背景資料:來源、特點(diǎn)、類型等 公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實(shí)驗(yàn)條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實(shí)驗(yàn)人員,保證您4× 核酸液相雜交液10mL品牌的實(shí)驗(yàn)得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。 4× 核酸液相雜交液10mL品牌操作步驟: 1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。 b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。 c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。 2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。 3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。 5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。 6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。 7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。 8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。 differentiated heart and gut tissues and is present throughout the course of development in the heart. Although expression patterns of the various GATA transcription factors may overlap, it is not yet apparent how the GATA factors are able to discriminate in binding their appropriate target sites. Function : Binds to the functionally important CEF-1 nuclear protein binding site in the cardiac-specific slow/cardiac troponin C transcriptional enhancer. May play an important role in the transcriptional program(s) that underlies smooth muscle cell diversity. Subcellular Location : Nucleus (By similarity). Similarity : Contains 2 GATA-type zinc fingers. 英文名稱 Anti-GADD34