實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    大鼠子宮平滑肌細胞

2.組織來源：子宮組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠子宮平滑肌細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚，由成束或成片的平滑肌組成，肌束間以結締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能，收縮受激素的調節(jié)，其收縮活動有助于精子向輸卵管運送、經血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管，如果平滑肌層細胞過度生長，勢必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，體外培養(yǎng)平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制。子宮平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。子宮平滑肌細胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài)，在孕期能的擴張子宮容積，保證胎兒孕育環(huán)境；②平滑肌細胞有收縮舒張能力，在生產時能形成生理性的縮腹環(huán)，推動胎兒向下移動，輔助生產。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠子宮平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠子宮平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R052

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

素B Polymyxin B 2.25萬單位*5支 0.625-40 ng/mL 人Gremlin 1(GREM1)ELISA試劑盒

2 ug P416 GPD P416 GPD 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人補體因子1(Complement factor I)ELISA試劑盒

250mL Raffinose Solution（棉子糖溶液）,20%  Raffinose Solution,20%  常溫保存 62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human

大鼠子宮平滑肌細胞1瓶 PC-12(高分化)細胞株 PC-12(高分化) 低溫運輸和保存

10mL 氨芐溶液,50mg/mL Ampicillin Solution -20℃保存

phospho-Ephrin B(Tyr324/329)  磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格: 0.1mlATG9B  自噬相關蛋白9B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-CY5  PE-CY5標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1mlIntegrin alpha 1/CD49a  整合素α1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

Myocardin  促管平滑肌細胞分化因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-IKK beta(Tyr188)  磷酸化KB抑制蛋白激β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgM/PE  PE標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

RABGAP1  Rab蛋白GTP激活蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlCOX7A2  氧化VIIA亞型2抗體 0.1ml

Phospho-Histone H3 (Thr11)  磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme  泛素激活E1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml