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elisa定量檢測試劑盒檢測方法和抗體分析

時(shí)間:2017-4-14閱讀:145
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elisa定量檢測試劑盒如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。
一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。
這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計(jì)進(jìn)行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于elisa定量檢測試劑盒,實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時(shí)更有幫助。
多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
elisa定量檢測試劑盒如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素。
盡管現(xiàn)在購買源自動(dòng)物的抗體越來越容易,我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時(shí),檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。
如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合,實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。elisa定量檢測試劑盒通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。

 

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