每種試劑都有其反應(yīng)模式，其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應(yīng)時間長，會造成整板本底高，陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴，ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板溫度都能迅速平衡，為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋。
    作為記錄測定結(jié)果的儀器，酶標儀的性能穩(wěn)定與否，決定結(jié)果的可靠度。

    首先酶標儀應(yīng)定期進行保養(yǎng)，對濾光片要定期校正；

    其次酶標儀波長設(shè)置要正確，使用雙波長，一個檢測波長，一個參比波長，以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。

    此外，ELISA試劑盒在用酶標儀讀數(shù)時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同，使用中應(yīng)詳細閱讀說明書
    綜上所述，盡管目前上以及我國有了部分標準血清或參比血清（血清盤），但是酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)目前在技術(shù)上尚未做到標準化。受方法學及技術(shù)條件的限制，在酶聯(lián)免疫吸附測定中有時不可避免的會出現(xiàn)一定的非特異性，ELISA試劑盒我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至低限底，從而提高檢測的特異性，并得到更準確、可靠的實驗結(jié)果。