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組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)ELISA試劑盒組成

時間:2018-11-20閱讀:166
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組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)ELISA試劑盒組成: 

(1)結合物及標本的稀釋液;

(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

(3)酶標記的抗原或抗體(結合物);

(4)酶的底物;

(5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),ELISA試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中);

(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)ELISA試劑盒操作流程: 

1. 組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)ELISA試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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