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貨號	A01X980	規格	1×106
英文名稱	SW48細胞	產品分類	人細胞系
實驗類型	DMEM+10%FBS+1%P/S	報告	提供STR鑒定報告

公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	SW480 [SW-480] (人結腸癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱	SW-480; SW 480; SW480E
種屬	人類
年齡（性別）	男性，50歲
組織來源	直腸；結直腸腺癌
生長特性	貼壁細胞
細胞形態	上皮細胞樣
背景描述	SW480 [SW-480]細胞源自原位直腸腺癌，和SW620細胞源自同一病人一年后的淋巴結轉移。CSAp和直腸抗體3陰性；角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導致Pro→Ser替代。細胞p53蛋白表達水平提高，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性，癌基因N-myc的表達未做檢測。SW480 [SW-480]細胞不表達細胞溶解酶，一種與腫瘤入侵相關的金屬蛋白酶。有報道稱，SW480 [SW-480]細胞表達GM-CSF。SW480 [SW-480]細胞ras原癌基因的12位密碼子有一個突變，可以用作PCR法檢測該突變的陽性對照。1978年11月，A·Leibovitz將其提交給ATCC時已傳代至第91代。
生物安全等級	1
生長培養基	Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:2-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
倍增時間	~30-50小時
凍存條件	凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養條件	氣相：空氣，100% 溫度：37℃
致瘤性	Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
受體表達情況	epidermal growth factor (EGF)
基因表達情況	carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta, myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17; Blood Type A; Rh+, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining., The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis and fos oncogenes.
保藏機構	ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313 ECACC; 87092801

細胞傳代：

1. 試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。

2. 棄掉培養皿中的培養基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養基終止反應。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養液重懸細胞，細胞計數后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養皿。

8. 將合適體積培養液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養皿中，使其均勻分布。

9. 將培養皿轉入 CO2培養箱中培養，第二天轉染。

細胞轉染：

1. SW48人結腸腺癌細胞轉染試劑的準備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。

細胞培養實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養細胞，同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用。
③使用培養液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養液應立即封閉瓶口，培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發現原有的細胞遺傳物發生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。

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