上海晶抗生物工程有限公司
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閱讀：132發布時間：2017-4-20
討論豬ELISA Kit白介素的標本請求
豬ELISA Kit白介素敏感性高，特異性強，重復性好的試驗診斷辦法，試劑安穩、易保留，操作簡潔，成果判別較客觀等要素，已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中。
豬ELISA Kit白介素（IL-17）標本請求：
1．標本收集后盡早進行獲取，獲取按有關文獻進行，獲取后應盡快進行試驗。若不能立刻進行試驗，可將標本放于-20℃保留，但應防止重復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 按捺辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
豬ELISA Kit白介素操作過程：
1. 規范品的稀釋：本試劑盒供給原倍規范品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
20 ng/L 5 號規范品 150μl 的原倍規范品參加150μl 規范品稀釋液
10 ng/L 4 號規范品 150μl 的5 號規范品參加150μl 規范品稀釋液
5 ng/L 3 號規范品 150μl 的4 號規范品參加150μl 規范品稀釋液
2.5 ng/L 2 號規范品 150μl 的3 號規范品參加150μl 規范品稀釋液
1.25 ng/L 1 號規范品 150μl 的2 號規范品參加150μl 規范品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其他各步操作一樣）、規范孔、待測樣品孔。在酶標包被板上規范品加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終究稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗刷液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗刷：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗刷液，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次，拍干。
6. 加酶：每孔參加酶標試劑50μl，空白孔在外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗刷：操作同5。
9. 顯色：每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反響（此刻藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序丈量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加停止液后15 分鐘以內進行。
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