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技術(shù)文章

正確操作小鼠ELISA試劑盒的步驟

閱讀:154發(fā)布時間:2017-7-17

小鼠ELISA檢查試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。

 

小鼠ELISA檢查試劑盒操作過程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩下板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置規(guī)范品孔、樣本孔和空白孔,空白孔啥都不加;規(guī)范品孔各加不一樣濃度的規(guī)范品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加*40μL;
4. 隨后規(guī)范品孔和樣本孔中(空白孔不加)參加辣根過氧化物酶(HRP)符號的檢查抗體100μL,,用封板膜封住反響孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 一切孔參加底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 一切孔參加停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測定各孔的OD值。


小鼠ELISA檢查試劑盒操作注意事項:試劑盒保留在2-8℃,運用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運用;試驗中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保留;濃度為0 的S0 號規(guī)范品即可視為陰性對照或許空白;依照闡明書操作時樣本現(xiàn)已稀釋5 倍,zui終成果乘以5 才是樣本實踐濃度;嚴厲依照闡明書中標明的時刻、加液量及次序進行溫育操作。一切液體組分運用前充沛搖勻。

 


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