上海晶抗生物工程有限公司
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閱讀：287發布時間：2017-5-18
ELISA即酶聯免疫吸附法，是一種常用的固相酶免疫測定辦法。 由于ELISA辦法簡略，便利，活絡，特異性強且不需求特別設備（只需求酶標儀就可以），所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。
可是影響ELISA測定的要素有許多，而其操作中需求有必定的技能要求，如操作辦法，環境，樣本等，有時常可見到一些過錯成果（即假陽性或假陰性）等，樣本的重要性關系到全部試驗的成果，上海晶抗生物為我們解讀ELISA檢查的影響要素之一-樣本的影響
1、ELISA試劑盒樣本的保留：在冰箱中保留過久的標本，在間接法ELISA測定中會致使本底過深、會形成假陽性；為防止上述問題，在測定血清標本時新鮮收集；假如不能立即測定，依據相應的時刻保留相應的溫度，5 d內測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應-20℃低溫凍存；如凍存后融解的標本，蛋白質有些濃縮，散布不均，應充沛混合后再測定，但混勻時應輕柔，不行強烈振蕩。
2、ELISA試劑盒樣本的凝結：樣本凝結不全。在試驗中，有的時分心急為了爭取時刻快速檢查，在血液還未開端凝結的時分就強行離心別離血清，致使血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測定過程中形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易形成假陽性成果；因而血液標本收集后有必要使其充沛凝結后再別離血清。
3、樣本的時刻：由于塑料試管能吸附抗原物質，所以樣本長時刻放在塑料管內會使樣本內抗原含量降低形成假陰性。特好的辦法是運用真空*；并運用非抗凝標本，肝素抗凝血漿會添加OD值，EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。
4、樣本受細菌污染：因菌體中可能會富含內源性辣根過氧化物酶，因而，被細菌污染的標本同溶血標本相同，可能會發生非特異性顯色而攪擾測定成果。
5、ELISA試劑盒樣本溶血：溶血標本及混有紅細胞的血清選用ELISA法檢查易發生假陽性。可能是溶血血清中富含過氧化酶物質（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中通常難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態氧（O），然后催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質，即顯藍色，發生假陽性［2］。所以嚴峻溶血標本禁用。
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