ELISA試劑盒手工操作有浸泡式和流水沖刷式兩種，浸泡式進(jìn)程如下：
A、吸干或甩干孔內(nèi)反響液；
B、用洗刷液過洗一遍（將洗刷液注滿板孔后，即甩去）；
C、浸泡，行將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖晃，浸泡時(shí)刻不可隨意縮短；
D、吸干孔內(nèi)液體，吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清洗毛巾或吸水紙上拍干；
E、重復(fù)操作c和d，洗刷3-4次（或按闡明規(guī)則）。
ELISA試劑盒操作技能的影響：
1）應(yīng)確保清潔，整個(gè)操作過程中確保酶標(biāo)板不接觸次氯酸，以上的辦法可以使“花板”降至zui低極限，然后進(jìn)步檢測的特異性，并得到更。
2）合理安排檢丈量，ELISA試劑盒避免反響板過多形成洗板等待時(shí)刻長。
3）加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。
4）用洗板機(jī)洗板時(shí)，確保洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選潔凈、無或少塵的吸水資料）上輕輕拍干，避免針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易發(fā)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的呈現(xiàn)。
5）嚴(yán)峻溶血：以HRP為符號的ELISA試劑盒測定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色形成假陽性。
削減ELISA試劑盒差錯(cuò)的辦法
1.做試驗(yàn)時(shí)少說話，避免唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。
2.參加一抗二抗需求放入37°。
3.如果一起做多個(gè)板子，多個(gè)板子別羅一起；盡量少用排槍。
4.加樣時(shí)，由低濃度向高濃度加，這樣削減跳孔的幾率。
5.勤換槍頭。
一、移液器的運(yùn)用，加樣（抗體）等需求定量的試劑時(shí)不運(yùn)用排槍，經(jīng)歷證明排槍很不，極易跳孔，不要圖廉價(jià)買等級低的tips 由于ELISA不但會(huì)擴(kuò)大被檢測的意圖蛋白，也會(huì)擴(kuò)大非特異結(jié)合的雜質(zhì)蛋白。
二、倍比稀釋樣品時(shí)，稀釋倍數(shù)要小于10。
三、一切的裝跟ELISA測定試劑盒相關(guān)試劑的容器，玻璃制品的要干烤過或許運(yùn)用一次性的樹脂容器。