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鑒別ELISA試劑盒真偽的方法

時間:2018/3/26閱讀:260
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鑒別ELISA試劑盒真偽的方法:

一.利用干擾實驗即可辨別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:

(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體

(3) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物

(4) 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(5) 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

二. 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:

(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。

(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。

(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。

(5) 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條
標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

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