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ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的運用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測作用影響較大,ELISA試劑盒如不留意,有也許致使顯色不全、花板等成果。今日我們將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)疑問解決辦法總結于下,整理出應對戰(zhàn)略:
挑選試劑:挑選質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格依照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
標本搜集與保留:防止運用肉眼可見的溶血標本、高脂標本和混濁標本;2-8℃下,標本可放置24-48小時,長時間保留需放置-20℃下。請防止重復凍融。
試劑盒中會有提示,通常需求預備的有:
洗滌液;用前制造;有的試劑盒會標明,配好的4度下通常能夠放一個月;假如沒有標明,盡量用新鮮的,不要多制造。
顯色液(有A液和B液的),用前15分鐘制造;
規(guī)范品:有的試劑盒中規(guī)范品是現(xiàn)已制造好的,4度保留,有的是要現(xiàn)制造的,依照說明書操作;
濃縮*的二抗和HRP:假如需求制造,ELISA試劑盒沒注明配好能夠保留多久的話,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用(用前15分鐘制造);
原則是:試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話,應當現(xiàn)配現(xiàn)用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,避免蓋子上粘連今后總量不行。室溫溫育的試劑,特別是溫育時間比較短的試驗操作的試劑,加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大,特別要留意加樣疑問。
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