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配制培養基的細節解說

時間:2015/4/13閱讀:886
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    配制培養基主要有五個步驟,它們分別是配制溶液、調節pH值、過濾、分裝、加棉塞,以下就是我公司為您分享的有關配制培養基的細節解說。

*、配制溶液:向容器內加入所需水量的一部分,按照培養基的配方,稱取各種原料,依次加入使其溶解,zui后補足所需水分。對蛋白胨、肉膏等物質,需加熱溶解,加熱過程所蒸發的水分,應在全部原料溶解后加水補足。配制固體培養基時,先將上述已配好的液體培養基煮沸,再將稱好的瓊脂加入,繼續加熱至*融化。并不斷攪拌,以免瓊脂糊底燒焦。

第二、調節pH值:用pH試紙(pH電位計、氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl10%NaOH進行調節,直到調節到配方要求的pH值為止。

第三、過濾:用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養基過濾。用紗布過濾時,折疊成六層,用濾紙過濾時,可將濾紙折疊成瓦棱形,鋪在漏斗上過濾。

第四、分裝:已過濾的培養基應進行分裝。如果要制作斜面培養基,須將培養基分裝于試管中。如果要制作平板培養基或液體、半固體培養基,則須將培養基分裝于錐形瓶內。分裝時,一手捏松彈簧夾,使培養基流出,另一只手握住幾支試管或錐形瓶,依次接取培養基。分裝時,注意不要使培養基粘附管口或瓶口,以免浸濕棉塞引起雜菌污染。裝入試管的培養基量,視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養基時,每只15×150毫米的試管,約裝34毫升(1/41/3試管高度),如制作深層培養基,每只20×220毫米的試管約裝1215毫升。每只錐形瓶裝入的培養基,一般以其容積的一半為宜。

第五、加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應緊貼內壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內,上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札,準備滅菌。 

第六、制作斜面培養基和平板培養基:培養基滅菌后,如制作斜面培養基和平板培養基,須趁培養基未凝固時進行。

1.制作斜面培養基。在實驗臺上放1支長0.51米左右的木條,厚度為1厘米左右。將試管頭部枕在木條上,使管內培養基自然傾斜,凝固后即成斜面培養基。

2.制作平板培養基。將剛剛滅過菌的盛有培養基的錐形瓶和培養皿放在實驗臺上,點燃酒精燈,右手托起錐形瓶瓶底,左手拔下棉塞,將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,左手打開培養皿蓋,右手迅速將培養基倒入培養皿中,每皿約倒入10毫升,以鋪滿皿底為度。鋪放培養基后放置15分鐘左右,待培養基凝固后,再5個培養皿一疊,倒置過來,平放在恒溫箱里,24小時后檢查,如培養基末長雜菌,即可用來培養微生物。

    以上就是配制培養基的細節解說,我公司主營AmrescoSpectrum等品牌進口培養基,價格合理,質量穩定,咨詢了解產品及相關技術,歡迎您的來電。

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