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溫習(xí)下——滬鼎ELISA試劑盒特點(diǎn)

時(shí)間:2018-5-8閱讀:696
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    ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技能之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技能。此項(xiàng)技能自70年代初面世以來(lái),發(fā)展十分迅速,現(xiàn)在已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
     

    ELISA試劑盒ELISA原理——ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為根底,將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技能。因?yàn)榭乖⒖贵w的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每參加一種試劑孵育后,可通過(guò)洗刷除去多余的游離反應(yīng)物,然后確保試驗(yàn)成果的特異性與安穩(wěn)性。在實(shí)踐運(yùn)用中,通過(guò)不同的規(guī)劃,詳細(xì)的辦法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法,用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
 

ELISA試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備作業(yè)
1. 請(qǐng)?zhí)嵩?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗刷液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗刷液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再洗刷液。(加熱溫度不要超越50℃)運(yùn)用時(shí)洗刷液應(yīng)為室溫。
3. 規(guī)范品: 參加規(guī)范品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干規(guī)范品中,靜置10分鐘,待其充沛溶解后,悄悄混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)。主張成以下濃度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如2500pg/ml規(guī)范品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述規(guī)范品參加含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其他濃度以此類推。
4. 生物素化抗體作業(yè)液:試驗(yàn)前核算當(dāng)次試驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì)),實(shí)踐時(shí)應(yīng)多100-200μl。運(yùn)用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成作業(yè)濃度。當(dāng)日運(yùn)用。
5. 酶結(jié)合物作業(yè)液:試驗(yàn)前核算當(dāng)次試驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì)),實(shí)踐時(shí)應(yīng)多 100-200μl。運(yùn)用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成作業(yè)濃度。當(dāng)日運(yùn)用。

 

    ELISA試劑盒試劑特色——Elisa試驗(yàn)敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,ELISA試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡(jiǎn)潔,成果判別較客觀等因素。

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