在實際操作中，除了選擇優(yōu)良的試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
現(xiàn)在讓我司錢為大家分析下ELISA實驗操作過程中影響結(jié)果的原因并給出了相對應(yīng)的解決方法如下：
一：加樣
可能原因： 
1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣；
2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 
3.加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1.標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2.加樣后及時放入孵箱。 
3.加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
二：孵育
可能原因： 
1.孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*; 
2.孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：
1.貼封片或加蓋； 
2.按說明步驟嚴格控制操作時間。
三：洗板
可能原因： 
1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2.采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞，抽吸不*;洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3.反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 
解決辦法： 
1.保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2.合理安排，或多用幾臺洗板機。
四：顯色
可能原因： 
1.顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2.加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。
解決辦法： 
1.顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用；
2.加樣時保持顯色劑不外流；