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ELISA試劑盒
微生物培養(yǎng)基
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小鼠l型膠原氨基末端肽(NTX)ELISA試劑盒說明書

時間:2013-10-21閱讀:137
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小鼠ELISA試劑盒 實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠l型膠原氨基末端肽(NTX)水平。用純化的小鼠l型膠原氨基末端肽(NTX)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入l型膠原氨基末端肽(NTX),再與HRP標記的l型膠原氨基末端肽(NTX)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的l型膠原氨基末端肽(NTX)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠大鼠l型膠原氨基末端肽(NTX)濃度。

試劑盒組成:
試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
保存

說明書
1份
1份


封板膜
2片(48)
2片(96)


密封袋
1個
1個


酶標包被板
1×48
1×96
2-8℃保存

標準品:18nmol/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8℃保存

標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8℃保存

酶標試劑
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存

樣品稀釋液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存

顯色劑A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存

顯色劑B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存

終止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存

濃縮洗滌液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8℃保存
 

小鼠ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
 

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