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核糖體P蛋白自身抗原

時(shí)間:2012/10/19閱讀:443
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  1.定義  核糖體P蛋白是三種蛋白質(zhì)P0、P1和P2的總稱,位于核糖體60S亞單位,經(jīng)SDS-PAGE電泳確定其分子量分別為38kD、19kD和17kD。與核糖體內(nèi)大多數(shù)堿性蛋白質(zhì)相比,Pl、P2是酸性的,富含*,而*含量少。

 
    2.特性  免疫電鏡顯示,三種P蛋白形成一五聚體[P1P2]:P0,P1和P2形成的雙二聚體經(jīng)P2的氨基端與P0結(jié)合。
 
    生物化學(xué)研究顯示P1/P2在核糖體多肽合成的三個(gè)階段:起始、轉(zhuǎn)位和終止中都起著重要的作用。Mac Connel等人選擇性去除核糖體中的Pl、P2,結(jié)果蛋白不能合成而*核苷三磷酸鹽的活性亦喪失。高滴度的抗—P血清Fab片段可*抑制體外蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)中球蛋白mRNA的翻譯。將抗核糖體P抗體顯微注射人培養(yǎng)的人類細(xì)胞,也可抑制蛋白質(zhì)的合成。
 
    三種P蛋白的共同抗原決定簇位于羥基端高度保守部分,為11個(gè)氨基酸組成的線性表位。三種蛋白質(zhì)羧基端氨基酸序列相似,氨基端則不同。
 
    3.來(lái)源  60S核糖體亞單位可由蔗糖梯度離心,從幾乎所有的真核細(xì)胞都能得到。常用制備來(lái)源是鼠肝、兔網(wǎng)織紅細(xì)胞。雖然核糖體粗提物也可用于蛋白質(zhì)印跡(免疫印跡)的檢測(cè),但合成的P肽和P融合蛋白是ELISA法或放射免疫法檢測(cè)抗P抗體的佳來(lái)源。

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