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選擇雜交瘤細胞及抗體檢測

時間：2012/9/15閱讀：580
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1．HAT選擇雜交瘤細胞  脾細胞和骨髓瘤細胞經PEG處理后形成多種細胞的混合體，只有脾細胞與骨髓細胞形成的雜交瘤細胞才有意義。在HAT選擇培養液中培養時，由于骨髓瘤細胞缺乏胸苷激酶或次黃嘌呤*核糖轉移酶，故不能生長繁殖，而雜交瘤細胞含有上述兩種酶，在HAT選擇培養液中可以生長繁殖。用HAT選擇培養1～2d內將有大量瘤細胞死亡，3—4d后瘤細胞消失，雜交細胞形成小集落。HAT選擇培養液維持7一tod后應換用HT培養液，再維持2周，改用一般培養液。在上述選擇培養期間，雜交瘤細胞布滿孔底l／10面積時，即可開始檢測特異性抗體，篩選出需要的雜交瘤細胞系。在選擇培養期間，一般每2～3d更換一半的培養液。

 
    2．抗體的檢測  檢測抗體的方法應根據抗原的性質、抗體的類型不同選擇不同的篩選方法，一般以快速、簡便、特異、敏感為原則。常用的方法有以下4種。
    （1）RIA可用于可溶性抗原、細胞McAb的檢測。
    （2）ELISA可用于可溶性抗原、細胞和病毒等McAb的檢測。
    （3）免疫熒光試驗適合于細胞表面抗原的McAb的檢測。
    （4）其他如IHA、細胞毒性試驗等。

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