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已超過(guò)百萬(wàn)閱讀量的細(xì)胞培養(yǎng)技巧你還不點(diǎn)開(kāi)看看

時(shí)間:2022/7/17閱讀:133
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已超過(guò)百萬(wàn)閱讀量的細(xì)胞培養(yǎng)技巧,你還不點(diǎn)開(kāi)看看?

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細(xì)胞培養(yǎng)的路上,有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼淚,聽(tīng)小編幾句話。希望我所說(shuō)的能幫助你細(xì)胞培養(yǎng)的路上,少一點(diǎn)污染,多一點(diǎn)快樂(lè)!

一: 細(xì)胞方面

1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者丁香通。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,可以買個(gè)支原體檢測(cè)的試劑盒定期檢測(cè)一下。

4. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同。有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō) MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索。

5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。記住,是每天。

二: 操作方面

1. 不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套。自己的東西自己包自己烘干。頭什么的只要有可能污染就換。

2. 嚴(yán)格無(wú)菌操作。操作臺(tái)一定要擺個(gè)酒精燈,所有操作緊密圍繞在酒精燈周圍進(jìn)行。離開(kāi)過(guò)操作臺(tái)的東西再進(jìn)操作臺(tái)之前一定要用酒精消毒一遍,稍微烤一下,別直接放到火上,離一段距離。包括一切實(shí)驗(yàn)耗材、儀器、以及你帶著手套的手。

3. 水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,記得要勤換。身體的各個(gè)部分盡量的少接觸不需要接觸的地方的地方。比如實(shí)驗(yàn)臺(tái),又比如培養(yǎng)箱內(nèi)部。培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間*用酒精棉擦洗一次。

4. 細(xì)胞房日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸。晚上離開(kāi)的時(shí)候給細(xì)胞房照紫外,超凈臺(tái)是用完就開(kāi)。是同一時(shí)間就你一個(gè)人在細(xì)胞房養(yǎng)細(xì)胞。

5. 動(dòng)作要既輕柔又有力。動(dòng)作太重會(huì)有一堆一堆的氣泡,動(dòng)作太輕就吹不下來(lái)。剛開(kāi)始的時(shí)候吹細(xì)胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后來(lái)就是吹的時(shí)候里的培養(yǎng)基不要一次全都?jí)撼鰜?lái),留一點(diǎn),的最頭部盡量深的在液面以下。

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