當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TGzms-A人顆粒酶AELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | Gzms-A人顆粒酶AELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human granzymes A, Gzms-A Elisa Kit |
貨號 | FS-H63945 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
β-甘油磷二鈉五水合物有效期: 3年溶解性: 100mg/ml in War別名: 2-(二氫磷)-1,2,3-丙三醇二鈉鹽英文名稱: Glycero 2-phospha disodium salt
茶多酚有效期: 3年溶解性: 50 mg/mL in war別名: 綠茶提取物;茶鞣質;茶單寧茶英文名稱: Green a Extract Powder
甜菜有效期: 2年溶解性: 1 g/mL in war別名: 甜菜素;銨乙內酯;甘氨三內鹽;英文名稱: Betaine
親和素有效期: 6年級別: Reagent Grade溶解性: 10 mg/mL War來源: Chicken egg whi
阿拉伯樹膠有效期: 2年級別: Biochnology Grade溶解性: 100mg/ml in war別名: 阿拉伯樹膠;Arabic gum
化乙酰膽有效期: 1年級別: Reagent Grade溶解性: 100mg/ml in War別名: 乙酰化膽,; 2- (乙酰氧基)-N,N,N-基乙銨化物; 2-(Acetyloxy)-N,N,N-trimethylethanaminium chloride; ACh
微晶纖維素有效期: 3年別名: 微晶質 微晶體 纖維素英文名稱: Microcrystalline cellulose: 9004-34-6
軟骨素有效期: 2年級別: 食品級來源: 牛骨溶解性: 100mg/ml in War
Gzms-A人顆粒酶AELISA試劑盒實驗原理CD3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD3抗體IgGβ-連環蛋白/β-連環素/β鏈接素抗體5-溴-6-煙Mouse β-TG (β-Thromboglobulin) ELISA Kit
CD3/PE 熒光素PE標記CD3抗體IgGβ-連環蛋白/β-連環素/β鏈接素抗體5-溴-6-煙Mouse GLTP (Glycolipid Transfer Protein) ELISA Kit
CD4/FITC 熒光素標記CD4蛋白抗體IgG癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體3-苯肼鹽鹽Mouse GDF6 (Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit
CD4/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記CD4抗體IgG血型抗原前體蛋白抗體3-苯肼鹽鹽Mouse ALT (Alanine Transaminase) ELISA Kit
CD4/PE 熒光素PE標記CD4抗體IgG凱爾血型糖蛋白CD238抗體5-溴-2-煙Mouse IL-21 (Interleukin 21) ELISA Kit
CD5/FITC 熒光素標記CD5抗體IgG嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體2,3,5,6-四-7,7,8,-四二甲基對苯醌Mouse PLAUR/uPAR (Plasminogen Activator, Urokinase Receptor) ELISA Kit
CD5L/Api6/FITC 熒光素標記CD5L抗體IgG骨形態發生蛋白10抗體2,3,5,6-四-7,7,8,-四二甲基對苯醌Mouse αHBDH (α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit
CD6/TP120/FITC 熒光素標記CD6抗體IgG溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標志物)磺Mouse GLUT1 (Glucose Transporter 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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