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α GCα葡萄糖苷酶可見分光光度法

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-12 09:10:30瀏覽次數(shù):124次

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貨號 FS-01S63624
α GCα葡萄糖苷酶檢測試劑盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:烏美司:58970-76-6冰凍切片免疫熒光顯微鏡直接檢測試劑盒(含熒光一抗)
人抗信號識別顆粒抗體(SRP)ELISA試劑盒TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學HRP聯(lián)DAB基礎檢測試劑盒(無一抗和二抗)
112-29-81-溴癸烷TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學HRP聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)
112-85-6二十二烷

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:α  GCα葡萄糖苷酶檢測試劑盒可見分光光度法

規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

貨號:FS-01S63624

商品介紹:

測定意義

α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖,不僅與細胞壁的松弛或加固有關,而且與細胞識別和一些信號分子產(chǎn)生密切相關。

測定原理:

α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。

自備用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
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珠蛋白1抗體Human ODF1 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白抗體流式組化

間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體Human ODF3 ELISA KitL-甘

G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體Human NXN ELISA Kit磷酰二肽

黑色瘤相關抗原11抗體Human ODF2L ELISA KitN-乙酰-L-色

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