ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
轉(zhuǎn)錄因子ETV7抗體產(chǎn)品別名: 3-甲磺酰氨苯頭孢曲松鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）

ELAVL1抗體產(chǎn)品別名: (3R,4R)-3-氨-4-羥吡咯烷-1-甲叔丁酯頭孢噻吩（標(biāo)準(zhǔn)品）

胚胎干相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體產(chǎn)品別名: 二乙二代氨鈉頭孢噻呋鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)

表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗體產(chǎn)品別名: 4,4,5,5,5-五氟-1-戊頭孢噻肟鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)

紅膜蛋白條帶EPB41L5抗體產(chǎn)品別名: 3-氟-2-甲頭孢妥侖匹酯(標(biāo)準(zhǔn)品)

早期發(fā)育調(diào)控蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 匹伐他汀鈣頭孢西丁鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）

轉(zhuǎn)錄因子ETV6抗體產(chǎn)品別名: 6-溴-3,4-二氫-2H-異喹啉-1-酮頭孢西丁（頭孢西丁）（標(biāo)準(zhǔn)品）

跨膜通道蛋白8抗體產(chǎn)品別名: 2-氨-6-苯頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)

尤文氏肉瘤相關(guān)EWS蛋白抗體產(chǎn)品別名: 2-三氟甲-4-氨吡啶頭孢唑啉鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）

核外切酶1抗體產(chǎn)品別名: 順-六氫異吲哚林頭孢唑肟(標(biāo)準(zhǔn)品)

多發(fā)性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體產(chǎn)品別名: 阿卡他定頭孢唑肟鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)

核糖體RNA合成蛋白40抗體產(chǎn)品別名: 4-咪唑哌啶土拉霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品)

核糖體RNA合成蛋白42抗體產(chǎn)品別名: 3-苯芐溴褪黑素,松果體素（標(biāo)準(zhǔn)品）

多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體產(chǎn)品別名: Nα-Fmoc-Nε-生物素-L-賴氨托吡卡（標(biāo)準(zhǔn)品）

轉(zhuǎn)錄因子EYA1抗體產(chǎn)品別名: Y-27632托吡酯（標(biāo)準(zhǔn)品）
干擾素誘導(dǎo)蛋白10撫生ELISA試劑盒Human DPEP1(Dipeptidase 1) ELISA Kit五通橋毛霉用途: 從豆腐乳中分離

Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA Kit球型接合酵母拉丁屬名: Zygosaccharomyces  globiformis

Human PRNP(Major prion protein) ELISA Kit地衣芽孢桿菌用途: 飼料、食品

Human S100A10(Protein S100-A10) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

Human STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

Human FZD4(Frizzled-4) ELISA Kit葡萄擬莖點(diǎn)霉拉丁屬名: Diaporthe viticola

Human UBQLN1(Ubiquilin-1) ELISA Kit灰葡萄孢(測(cè)序正確）拉丁屬名: Botrytis cinerea Persoon

Human NFKB2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit根瘤菌用途: 固氮

Human CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA Kit鹽地喜鹽芽孢桿菌拉丁屬名: Halobacillus locisalis

Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA Kit根霉菌拉丁屬名: Rhizopus sp.
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)