原代人心臟纖維原細胞
人心臟纖維原分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時,纖維細胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細胞而參與修復(fù)過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞,如在組織損傷后的修復(fù)過程中,纖維細胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,高爾基復(fù)合體不發(fā)達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質(zhì)較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負責(zé)細胞基質(zhì)外的合成,當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對心肌成纖維細胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。 |
方法簡介:
公司實驗室分離的人心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
英文名稱 | Human Cardiac Fibroblast Cells | 組織來源 | 心臟組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1273 |
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁,可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1~2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細菌、真菌、霉菌的污染,一旦發(fā)現(xiàn),要及時清除。
人胚肺成纖維細胞;WI-38[WI38] | 非洲綠猴腎細胞;GL-37 |
人肝癌細胞;HHCC | 綿羊痘病毒(SPPV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
人胎兒細胞株;HFT-8810[HFT8810] | 停乳鏈球菌(StD)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
人肝癌細胞;HB611 | 偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
小鼠白血病細胞;P388 | 乙型肝炎病毒cccDNA 染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304[ECV304;ECV304] | 莫氏立克次體PCR試劑盒 |
牛腎細胞;MDBK(NBL-1) | 牛流行熱病毒(BEFV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞 | 禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
牛陀螺狀細胞;BT | 麥類殼多胞斑點病菌PCR試劑盒 |
恒河猴腎細胞;LLC-MK2 | 柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞;RD | 雞源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 |
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-) | 山羊痘病毒(GTPV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
中國倉鼠肺細胞;CHL | 原代人心臟纖維原細胞流感病毒H6亞型(AIV-H6)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
中國倉鼠肺細胞;R1610[R1610] | 豬源性成分PCR試劑盒 |
登革病毒Ⅲ型檢測試劑盒 | 獼猴源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 |