ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | mTOR人雷帕霉素靶蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human mammalian target of rapamyein, mTOR Elisa Kit |
貨號 | FS-H64396 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
phosphoTau protein(Ser356) 微管相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Etravirined6
phosphoTau protein(Ser416) 微管相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Etravirine13C3
MAP2/MAP2a.b.c 微管相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Famotidine Related Compound A Hydrochloride
PhosphoMAP2(Ser136) 微管相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Famotidine Related Compound B
PhosphoMAP2 (Thr1620/1623) 微管相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Phenacetinethoxy213C
MAP1A 微管相關(guān)蛋白1A抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Phenacetinethoxy113C
Talin 踝蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Fluoxetine
PhosphoTalin (Ser425) 踝蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Meta Fluoxetine Hydrochloride
LTβ1英文簡稱LTβ1蛋白酶體PSMβ7抗體 檢測范圍:7945nmol/L500pg/mL
Neopterin英文簡稱NPras癌基因家族RAB8B抗體 檢測范圍:7946nmol/L8000pg/mL
Nerve growth factor英文簡稱NGFRas樣蛋白B抗體 檢測范圍:7947nmol/L1000pg/mL
1,25Dihydroxyvitamin D3英文簡稱1,25 DHVD3視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白5抗體 檢測范圍:7948nmol/L5000fmol/L
myosin heavy chainI英文簡稱MyHC根蛋白抗體 檢測范圍:7949nmol/L400pg/mL
SNN英文簡稱SNNRhoA蛋白抗體 檢測范圍:7950nmol/L40ng/ml
Tolllike receptor 7英文簡稱TLR7Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白抗體 檢測范圍:7951nmol/L10ng/mL
Tolllike receptor 9英文簡稱TLR9原癌基因相關(guān)蛋白RAP2B抗體 檢測范圍:7952nmol/L5000pg/mL
eperythrozoonosis antibody英文簡稱EPOAb環(huán)指蛋白6抗體 檢測范圍:7953nmol/L200ng/mL
Glucose6Phosphate英文簡稱G6P環(huán)指蛋白87 檢測范圍:7954nmol/L100ng/mL
Neopterin英文簡稱NEOP環(huán)指蛋白44抗體 檢測范圍:7955nmol/L8ng/ml
Reproductive and respiratory syndrome virus英文簡稱PRRS環(huán)指蛋白86 檢測范圍:7956nmol/L
Distemper virus英文簡稱CDV環(huán)指蛋白2抗體 檢測范圍:7957nmol/L
Influenza viruses A英文簡稱FLUA環(huán)指蛋白40抗體 檢測范圍:7958nmol/L
Coxsackie virus IgG antibody英文簡稱CoxVIgG環(huán)指蛋白8抗體 檢測范圍:7959nmol/L
環(huán)丙沙星雜質(zhì)I Ciprofloxacin impurity I 規(guī)格：50mg
環(huán)丙沙星雜質(zhì)E Ciprofloxacin impurity E 規(guī)格：50mg
環(huán)丙沙星雜質(zhì)H Ciprofloxacin impurity H 規(guī)格：50mg
環(huán)丙沙星雜質(zhì)C Ciprofloxacin impurity C 規(guī)格：50mg
環(huán)丙沙星雜質(zhì)B Ciprofloxacin impurity B 規(guī)格：50mg
2-萘酚 2- naphthol 規(guī)格：50mg/支
葡萄糖依諾沙星 Enoxacin gluconate 規(guī)格：100mg
5-巰基-1-磺甲基四唑(3-TSA) 5- -1- sulfonic acid methyl mercapto triazole (3-TSA) four 規(guī)格：50mg
6-氨基青霉烷 6- aminopenicillanic acid 規(guī)格：100mg
拉氧頭孢 Latamoxef 規(guī)格：100mg
阿莫西林克拉維系統(tǒng)適用性對照品 Amoxicillin clavulanic acid system suitability cool products 規(guī)格：30mg
利福布汀 Leigh Fob Dean 規(guī)格：100mg
mTOR人雷帕霉素靶蛋白ELISA試劑盒實驗原理磷化D酪氨激酶衰減蛋白1抗體Porcine LT-E4 (Leukotriene E4) ELISA Kit
磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Porcine CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit
磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Porcine BCDF (B-Cell Differentiation Factor) ELISA Kit
磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Porcine VASPIN (Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit
磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體Porcine HBF (Fetal Hemoglobin) ELISA Kit
磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體Porcine GARS (Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit
磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體Porcine ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit
7脫氫膽固還原酶抗體Porcine SIGLEC2 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
