堿性品紅乙醇溶液(5%)100ml免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
堿性品紅乙醇溶液(5%)100ml免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
堿性品紅乙醇溶液(5%)100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
LS 180(人結(jié)腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人胚腎上皮細胞系;KiMA
CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
KP-N-NS細胞，人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移) 小鼠骨髓瘤細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 CL-0397NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
Hep G2, 人肝癌細胞系
HHpC-c 人肝細胞(HHpC) 3-6 mio. 人支氣管平滑肌細胞HBSMC
人腎臟上皮細胞HREpiC
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照)
IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細胞
CM-H115人腦動脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞
人細胞;Hela 人晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人結(jié)腸平滑肌細胞裂解物HCSMCL
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
A549, 人肺癌細胞系 Human
NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞周期蛋白A1(CCNA1)免疫試劑盒 Human Cyclin-A1,CCNA1 ELISA kit
抗壞血酸(AsA)含量測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratneutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISA試劑盒大鼠中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
humanHistamine,HISELISA試劑盒人組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒
HumanThyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancoloncancer-specificantigen-4,CCSA-4ELISA試劑盒人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase,PDXPELISAKit人吡哆醛/吡哆醇維生素B6磷酸酶(PDXP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
堿性品紅乙醇溶液(5%)100ml免費代測人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人磷脂酶A2(PLA-2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
